對于單細(xì)胞懸液的制備和其單細(xì)胞的測序,通常我們都會選擇應(yīng)用專用的單細(xì)胞懸液制備儀來進(jìn)行樣品細(xì)胞的實驗操作。
單細(xì)胞制備儀是一種集成金屬浴消化與溫和剪切組織的新一代細(xì)胞懸液制備設(shè)備,應(yīng)用于流式細(xì)胞術(shù)/單細(xì)胞測序/原代細(xì)胞培養(yǎng)等實驗,具有起始組織量小,時間短,細(xì)胞得率高,細(xì)胞活性高的特點。采用國際DIN方法設(shè)計,低噪音,使用方便,性能穩(wěn)定,帶加熱功能,對樣品的消化處理過程始終處在恒溫狀態(tài)。
此次應(yīng)用單細(xì)胞制備儀的實驗?zāi)康木驮谟趯π∈蟮膭游锝M織肝、腎、脾單細(xì)的胞懸液制備,同時在實驗前還需準(zhǔn)備一些相配適用的研磨套裝管、濾管、移液槍、培養(yǎng)皿、鑷子、手術(shù)刀、PBS液、凈信消化酶、終止液等器具耗材試劑的應(yīng)用。
制備單細(xì)胞懸液的操作步驟:
1、開機(jī)預(yù)熱,打開加熱模塊1,加熱模塊2
2、取活體組織后,放入PBS液中去紅,然后取樣品
3、把消化酶用移液器加入研磨套裝管中,將加滿消化酶的離心管放入預(yù)熱模塊中預(yù)熱若干分鐘
4、將處理好的組織用鑷子轉(zhuǎn)移到加滿消化酶的離心管中
5、將裝滿消化酶和組織的離心管放置到加熱板中,選擇25分鐘程序,開始運行
6、程序結(jié)束取出離心管,將消化好的組織液轉(zhuǎn)移到過濾管中,即得到一管單細(xì)胞懸液
肝臟組織
脾臟組織
腎臟組織
應(yīng)用單細(xì)胞懸液制備儀不但對樣品組織的利用率高、單細(xì)胞產(chǎn)出高,且單細(xì)胞化過程高效。在針對組織單細(xì)胞測序時,可快速完成單細(xì)胞化處理,獲得高產(chǎn)且活率在85%以上的單細(xì)胞;在針對臨床穿刺樣本,可使組織的利用率達(dá)到百分之100,細(xì)胞產(chǎn)量可達(dá)10萬個以上v;在針對不同的樣本選擇不同的程序(6組預(yù)設(shè)程序),處理樣品量可達(dá)4*2ml/6*2ml/8*2ml;在針對原細(xì)胞培養(yǎng)樣本時,可在15min內(nèi)完成組織到單細(xì)胞過程,降低細(xì)胞逆境時間,提高細(xì)胞存活率。