在對(duì)單細(xì)胞組織的懸液制備實(shí)驗(yàn)中,成功的關(guān)鍵就在于獲得高質(zhì)量的單細(xì)胞懸液;但對(duì)于一些復(fù)雜多樣組織懸液的制備卻是一個(gè)不小的挑戰(zhàn),那怎樣才能從細(xì)胞組織樣品中獲得高質(zhì)量的單細(xì)胞懸液呢。
人體是由有機(jī)質(zhì)和無(wú)機(jī)質(zhì)組成的,是由細(xì)胞和細(xì)胞間質(zhì)組成的。由細(xì)胞組織組成器官,使其具有類似功能的器官。而人體組織又可分為四大組織,分別是上皮組織、結(jié)締組織、肌肉組織和神經(jīng)組織組成。
在對(duì)單細(xì)胞組織進(jìn)行測(cè)序懸液制備時(shí),是需要對(duì)細(xì)胞懸液進(jìn)行嚴(yán)格質(zhì)控的,以此來(lái)確保后續(xù)的單細(xì)胞實(shí)驗(yàn)?zāi)軌蝽樌M(jìn)行。為了保證單細(xì)胞樣品的活性,其通常建議使用新鮮的細(xì)胞組織來(lái)制備樣品細(xì)胞懸液。如果取樣后不能立即進(jìn)行測(cè)試,其樣品組織可以保存在組織保存液中,4℃溫度下保存。
在對(duì)單細(xì)胞組織測(cè)序制備的過(guò)程中,為了增加酶與組織的接觸面積,可在解離前盡量的切斷組織,另外在切斷組織時(shí)可加入少量含有10%FBS的細(xì)胞培養(yǎng)基,可避免組織細(xì)胞的脫水。
利用酶消化法來(lái)制備單細(xì)胞組織,主要是為了應(yīng)用酶來(lái)去除細(xì)胞間質(zhì)的纖維、蛋白等間質(zhì)物質(zhì),使其細(xì)胞脫落分散。又因?yàn)椴煌M織的細(xì)胞間質(zhì)不同,所以需要選擇特定的酶和特定的消化時(shí)間來(lái)操作。其中胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、膠原酶、中性蛋白酶、透明質(zhì)酸酶、彈性蛋白酶等都是一些常用的消化酶。
如果你也想要在樣品組織中獲得高質(zhì)量的單細(xì)胞懸液,那你也可以根據(jù)上述應(yīng)用技巧來(lái)操作哦,讓我們一起制備出高質(zhì)量的單細(xì)胞懸液。